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純化小技巧| 陽離子交換層析介質(zhì)MaXtar® S HC助力蛋白純化提升效率


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離子交換層析(ion-exchange chromatography,簡稱IEC)分離蛋白質(zhì)的原理是利用離子交換層析介質(zhì)上的可交換離子,與被分離蛋白所帶電荷的不同,在一定pH條件下發(fā)生交換平衡,從而實(shí)現(xiàn)分離。


通俗點(diǎn)講,就是帶正電荷的分子與陽離子交換層析介質(zhì)(CEX)結(jié)合,而帶負(fù)電荷的分子會(huì)與陰離子交換層析介質(zhì)(AEX)結(jié)合。


離子交換層析介質(zhì)在蛋白質(zhì)的分離純化中有著廣泛的應(yīng)用,主要是因?yàn)槠渚哂徐`敏度高、選擇性好、易于重復(fù)等優(yōu)點(diǎn),可以應(yīng)用在樣品粗純、中度純化及精純等純化過程中,同時(shí)可以用于DNA和內(nèi)毒素的去除上,對(duì)于抗體上的點(diǎn)電荷異構(gòu)體也有很好的分離效果。


百林科作為全方位供應(yīng)層析填料產(chǎn)品的企業(yè),在離子交換層析介質(zhì)上也有廣泛的產(chǎn)品覆蓋,以滿足客戶多樣化的純化需求。百林科陽離子交換層析介質(zhì)主要有MaXtar? S HC、MaXtar? SP HR、MaXtar? S等等。

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其中,MaXtar? S HC因其高載量、高分辨率的優(yōu)勢成為陽離子交換層析介質(zhì)中的明星產(chǎn)品,適用于單抗,雙抗,F(xiàn)c融合以及ADC等藥物純化,可有效去除聚集體、片段、電荷異構(gòu)體、HCP等。早期我們也有對(duì)其高載量、高回收率等有所介紹,今天重點(diǎn)介紹一下MaXtar? S HC的一些其他產(chǎn)品性能。


批間差異小,工藝穩(wěn)定

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對(duì)MaXtar? S HC的多個(gè)批次的動(dòng)態(tài)載量(QB10)數(shù)據(jù)進(jìn)行回顧,MaXtar? S HC保持較高的動(dòng)態(tài)載量(>100 mg IgG/ml),批間差異?。≧SD<10%)。


良好的放大性

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在600/500層析柱中,柱高26 cm時(shí),使用純水和1M NaCl測定MaXtar? S HC的壓力/流速性能,測定結(jié)果顯示流速≤300 cm/h,壓力<3 bar(0.3 MPa, 43.5 psi)。


保留時(shí)間短

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MaXtar? S HC在2~8 min保留時(shí)間內(nèi),動(dòng)態(tài)載量(QB10)仍保持較高的水平(>100 mg IgG/ml)。


HCP去除效果好

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同MaXtar? SP HR比較,MaXtar? S HC純化后,無論是等度還是線性洗脫,HCP的殘留量可以做到更低。


純化案例

層析柱:4.7 ml預(yù)裝柱,裝柱高度10 cm,柱體積約4.7 ml

樣品:陰離子交換層析介質(zhì)純化后的單抗料液

平衡緩沖液:50mM醋酸鈉,pH5.12

洗脫緩沖液:50mM醋酸鈉,1M氯化鈉,pH5.11,0~100%B 20CV

保留時(shí)間:5 min


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圖1. MaXtar? S HC的結(jié)合洗脫圖譜


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表1. MaXtar? S HC的純化結(jié)果


MaXtar? S HC純化后單抗樣品純度達(dá)99.4%,收率為92.6%,HCP去除效果顯著。


產(chǎn)品貨號(hào)


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訂貨信息

歡迎聯(lián)系當(dāng)?shù)劁N售和技術(shù)人員或撥打熱線:400-058-9000。


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