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豬圓環(huán)疫苗的純化工藝介紹

獸用疫苗是我國獸用生物制品最重要的組成部分，獸用疫苗銷售額占獸用生物制品銷售額的比例均超過90%，國內獸用疫苗銷售規(guī)模年均復合增長率為8.03%，高于國外水平，系國外獸用疫苗較國內更成熟。2018年我國獸用疫苗市場規(guī)模為120億元左右，其中豬用疫苗52.5億元，禽用疫苗42.18億元。預計2023年獸用疫苗市場規(guī)模可達250億元左右。

根據(jù)《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》，我國優(yōu)先防治的國內動物疫病中的一類疫病有口蹄疫、高致病性禽流感、高致病性豬藍耳、豬瘟、新城疫。從豬用疫苗終端價格來看，豬圓環(huán)苗價格相對較高，市場苗價格在9-18元/頭份左右。

目前共有53家生產(chǎn)企業(yè)獲得過豬圓環(huán)疫苗的生產(chǎn)批準文號，其中2021年和2022年共新增9家。目前豬圓環(huán)疫苗的研究方向主要是滅活疫苗以及基因工程重組疫苗。豬圓環(huán)病毒疫苗（porcine circovirus，PCV）有兩個血清型PCV-1和PCV-2，其中PCV-1為非致病性的病毒，PCV-2為致病性的病毒。

表格來源于：獸用疫苗行業(yè)研究

市面上豬圓環(huán)滅活病毒疫苗一般采用的宿主細胞為PK15，它需要通過微載體進行懸浮培養(yǎng)，通過增值獲得病毒后，進行滅活處理以及純化，超濾等步驟得到豬圓環(huán)滅活疫苗。豬圓環(huán)滅活病毒的生產(chǎn)工藝主要為凝膠過濾或者分子篩層析，根據(jù)病毒顆粒與雜質分子量的差異，采用4FF或6FF等凝膠過濾介質進行組分分離，從而達到分離豬圓環(huán)病毒與雜蛋白的目的，隨著新型的復合模式填料的推出，COll 400 也可以作為分子篩的替代方案，以提高生產(chǎn)效率。滅活的豬圓環(huán)工藝步驟可以總結如下圖：

另外可以采用昆蟲細胞桿狀病毒真核表達系統(tǒng)，其中Cap蛋白是PCV2病毒粒子唯一的結構蛋白，蛋白分子量大小約32kDa，自動組裝成穩(wěn)定的VLPs（高純度病毒樣顆?？乖邆涓玫拿庖咴?。其中Cap 蛋白為堿性蛋白，一般在細胞培養(yǎng)結束后，經(jīng)過澄清過濾后，采用一步高分辨率的陽離子進行捕獲，比如MaXtar SP HR已經(jīng)證明可以很好的用于Cap蛋白的捕獲。

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