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新品發(fā)布| 友好高效的陽離子交換層析介質(zhì)--MaXtar® S HC

抗體、重組蛋白等純化過程中，除去蛋白A親和和陰離子交換外，另一最重要的層析介質(zhì)就是陽離子交換層析介質(zhì)。陽離子交換層析介質(zhì)通常用在純化中的精純步驟，以去除HCP等痕量雜質(zhì)。隨著現(xiàn)代研發(fā)人員對產(chǎn)品純化的高要求，使用者對填料提出了高載量和回收率，兼具高選擇性的要求。在這種背景下，百林科通過不斷努力創(chuàng)新，研發(fā)出了具有高載量高分辨率的陽離子交換層析介質(zhì)-- MaXtar^? S HC。

MaXtar^? S HC是一款高載量高分辨率的強陽離子交換層析介質(zhì)，利用不同分子在特定條件下電荷性質(zhì)和多少的差異對其進(jìn)行分離。

相比于傳統(tǒng)的強陽離子交換層析介質(zhì)，MaXtar^? S HC表現(xiàn)出更優(yōu)的性能：

（1）改良的MaXtar基架具有更強剛性，因此在較低的反壓下能夠?qū)崿F(xiàn)更高工藝流速，提高工藝效率。

（2）通過升級配基偶聯(lián)方式，在保證分離效果的同時，兼具高動態(tài)結(jié)合載量。

參數(shù)介紹

* 結(jié)合載量的測量條件：4.7ml 預(yù)裝柱，裝柱高度：10cm，在保留時間為5分鐘時測量10% 穿透時的動態(tài)結(jié)合能力。測試緩沖液：50mM 醋酸鈉，pH 5.5（單克隆抗體）。

** 層析介質(zhì)在40℃，pH2-14環(huán)境下放置7天后，其理化性質(zhì)和功能沒有明顯變化。

*** v/v，體積比。

性能表現(xiàn)--高載量

采用CHO細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體（精純后蛋白）作為樣品，對MaXtar? S HC和MaXtar? SP HR的DBC（動態(tài)結(jié)合載量）進(jìn)行探索，發(fā)現(xiàn)：MaXtar? S HC的DBC明顯優(yōu)于MaXtar? SP HR，是其的2倍。實驗條件如下：

層析柱：4.7 ml預(yù)裝柱，裝柱高度10 cm，柱體積約4.7 ml

樣品：CHO細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體（精純后蛋白）

平衡緩沖液：50mM醋酸鈉，pH5.5

洗脫緩沖液：50mM醋酸鈉，1M氯化鈉，pH5.5

保留時間：5 min

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圖1. MaXtar? S HC和MaXtar? SP HR 10%穿透（QB10）曲線

表1. MaXtar? S HC和MaXtar? SP HR在QB10的動態(tài)結(jié)合力

微信圖片_20231215151124.png

性能表現(xiàn)--高回收率

我們采用0.8的安全系數(shù)，進(jìn)行上樣洗脫測試，發(fā)現(xiàn)：兩款填料的洗脫回收率都可以達(dá)到97%以上。實驗條件如下：

層析柱：4.7 ml預(yù)裝柱，裝柱高度10 cm，柱體積約4.7 ml

樣品：CHO細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體（精純后蛋白）

平衡緩沖液：50mM醋酸鈉，pH5.5

洗脫緩沖液：50mM醋酸鈉，1M氯化鈉，pH5.5

保留時間：5 min

圖2. MaXtar? S HC和MaXtar? SP HR的結(jié)合洗脫圖譜

表2. MaXtar? S HC和MaXtar? SP HR的純化結(jié)果

DMSO耐受--適用于ADC精純

MaXtar? S HC浸泡15%DMSO，200 h后，對浸泡前后的DBC（動態(tài)結(jié)合載量）和檢測過程中的壓力進(jìn)行對比，DMSO浸泡后MaXtar? S HC的DBC滿足浸泡前的95%以上，同時，浸泡前后壓力值均在可接受范圍內(nèi)，無明顯壓力上升情況。綜上所述，MaXtar? S HC層析介質(zhì)在15%DMSO溶液中200h穩(wěn)定。