滅活病毒疫苗作為一種成熟的生產平臺，依然作為很多病毒性疾病預防的最有效手段，比如狂犬病疫苗，針對滅活病毒疫苗的層析工藝，百林科可提供MaXtar COLL 700（多模式）或Chromstar 4FF（凝膠過濾）兩種純化方案。而在細胞基質的一些流感疫苗，除了分子篩填料的應用，也會再引入陰離子層析進一步控制雜質水平，百林科的MaXtar Q強陰離子交換層析介質可以完美勝任。

圖1 4FF 用于病毒性疫苗的純化

Ad5腺病毒是無包膜的雙鏈DNA病毒，具有很強的感染人體細胞的能力。Ad5腺病毒載體是較為成熟的平臺，是將腺病毒中負責復制的關鍵基因片段剪切掉，使其不能復制但保留其侵染人體細胞的能力，被稱作復制缺陷型腺病毒載體。再將目的抗原的序列插入到這種病毒載體中，人體接種該疫苗后，借助腺病毒載體較強的侵染能力，可迅速進入細胞，在細胞內釋放出編碼目的蛋白，成為可被機體識別的抗原。而不具備復制能力的腺病毒載體將被機體代謝。

通常，因為腺病毒借助于HEK293 可以大規(guī)模懸浮培養(yǎng)，下游采用超濾以及兩步層析（MaXtar COLL 700以及MaXtar Q HR）等工藝搭建成穩(wěn)定的平臺技術，作為一種成熟的生產體系應對突發(fā)的疾病而被重視，比如這次國內外在應對新冠疫情時，腺病毒載體疫苗均發(fā)揮了重要的作用。

在層析工藝中，結合COLL 700 獨特的設計優(yōu)勢而被廣泛應用于腺病毒載體的純化：

1. 獨特的雙層結構設計，以流穿模式處理700KD以上大分子，工藝優(yōu)化更容易，更方便線性放大。

2. 改良的MaXtar基架具有更強的剛性，因此在較低的反壓下能實現更高的工藝流速，提高工藝效率。

3. 相比傳統(tǒng)凝膠過濾層析，擁有更大的上樣量，降低成本。

圖2 MaXtar COLL 700 在病毒載體上的應用

基于重組蛋白或者VLP疫苗平臺的疫苗品種比較多：比如上市的重組HPV VLP疫苗，戊肝疫苗，乙肝疫苗等，研發(fā)中的重組如諾如以及腸道病毒VLP疫苗等。

同時重組蛋白疫苗路線被廣泛應用于帶狀皰疹疫苗，新冠疫苗，以及其他疫苗種類。

對于不同的重組疫苗，需要結合其不同的性質做層析工藝的選擇，通常情況下， 離子交換以及疏水層析則被經常性的用于該類疫苗的研發(fā)工藝中。比如SP 以及Butyl 會被經常用于HPV 疫苗多個亞型抗原的層析工藝中。在個別型別中，羥基磷灰石則因為其獨特的性能，而被用于去除內毒素以及殘留的HCP等雜質；強陰Q和Phenyl 則被經常用于帶狀皰疹疫苗的層析工藝中。除此之外，在一些重組蛋白以及VLP 疫苗工藝中，分子篩Geldex 200 pg被用于精純步驟用于去除降解片段以及HCP等雜質。

而百林科則可以提供一系列的層析介質產品用于工藝的開發(fā)，這些產品通常具有與進口品牌相當甚至更優(yōu)異的分離性能，經過對比測試，Q Chromstar FF 的分辨率略微高于Q XX FF見圖3。

圖3 Q Chromstar FF 的分辨率略微高于Q XX FF

隨著mRNA疫苗在新冠疫情中發(fā)揮的重大作用，核酸疫苗pDNA以及mRNA疫苗則廣泛進入到大眾的視野。

DNA或信使RNA(mRNA)序列被傳遞到體內來產生抗原，然后刺激免疫反應。核酸疫苗的優(yōu)點包括刺激細胞介導和體液免疫、易于設計、對不斷變化的病原菌株的快速適應性，以及可定制的多抗原疫苗。其中需要幫助來傳遞脆弱的DNA/mRNA有效載荷，納米顆粒(NPs)則是這一類疫苗的最有利的遞送載體。

pDNA本身既可以作為疫苗的產品，也是生產mRNA藥物的第一步，通常采用E.coli發(fā)酵，過程包括工程菌種子庫的建立和檢定，菌種復蘇，發(fā)酵培養(yǎng)、收獲澄清、層析純化、線性化、分裝儲存等步驟。

在純化上，百林科可以提供多種方案來靈活選擇，結合pDNA 的上游處理以及載量要求不同可選擇兩步層析到三步層析路線：

圖 4 可供選擇的pDNA純化工藝路線