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純化小技巧 | 百林科層析介質(zhì)助力ADC下游純化


改圖333.png

抗體偶聯(lián)藥物(Antibody-drug Conjugates,ADC)是一種治療腫瘤的新型療法。

通過(guò)鏈接物(Linker)將細(xì)胞毒性分子或藥物連接到單克隆抗體(mAb)上,使其同時(shí)具有化療藥物和靶向藥的特點(diǎn),精準(zhǔn)投放藥物,減少機(jī)體的不良反應(yīng)。


對(duì)于許多ADC客戶(hù)來(lái)說(shuō),生產(chǎn)制造過(guò)程中對(duì)于健康和安全等方面的風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)會(huì)格外重視,尤其是偶聯(lián)反應(yīng)的遏制,以及隨后通過(guò)多種途徑去除未偶聯(lián)的藥物、溶劑和不需要的產(chǎn)品變體。


ADC偶聯(lián)后純化工藝中常用離子交換或疏水層析介質(zhì)進(jìn)行精純,工藝中最大的挑戰(zhàn)是有機(jī)溶劑的存在,從而要求層析填料的化學(xué)穩(wěn)定性極好。偶聯(lián)過(guò)程中,常用的有機(jī)溶劑包括:二甲基亞砜(DMSO)、二甲基乙酰胺(DMAC)、二甲基甲酰胺(DMF)等,其中DMSO的應(yīng)用最常見(jiàn)。


圖片1.png

對(duì)此,百林科以ADC客戶(hù)常用的二甲基亞砜(DMSO)為研究溶劑,選擇相對(duì)高的15%的比例,檢驗(yàn)離子交換和疏水層析介質(zhì)對(duì)于DMSO的兼容性。



 離子交換層析介質(zhì)  


MaXtar? S HC載量高,且耐受DMSO有機(jī)溶劑

表1.png

表1 MaXtar? S HC DMSO浸泡前/后在QB10的動(dòng)態(tài)結(jié)合力

圖片2.png圖1 MaXtar? S HC檢測(cè)過(guò)程壓力曲線

MaXtar? S HC層析介質(zhì)在15%DMSO溶液中浸泡200h后載量和壓力無(wú)明顯變化,且在合格范圍內(nèi)。


MaXtar? SP HR分辨率高,且耐受DMSO有機(jī)溶劑

表2.png

表2 MaXtar? SP HR DMSO浸泡前/后在QB10的動(dòng)態(tài)結(jié)合力



MaXtar? SP HR層析介質(zhì)在15%DMSO溶液中浸泡200h后載量和粒徑均無(wú)明顯變化,且在合格范圍內(nèi)。


疏水層析介質(zhì)  


MaXtar? Phenyl (HS)耐受DMSO有機(jī)溶劑


圖片3.png

圖3 MaXtar? Phenyl (HS) DMSO浸泡前/后功能圖譜


MaXtar? Phenyl (HS)層析介質(zhì)在15%DMSO溶液中浸泡200h前后標(biāo)準(zhǔn)蛋白出峰時(shí)間對(duì)比基本一致。


綜上所述,百林科離子交換層析介質(zhì)MaXtar? S HC、MaXtar? SP HR和疏水層析介質(zhì)MaXtar? Phenyl (HS)在15%DMSO溶液中200h穩(wěn)定。


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